Анализ на сифилис время. Анализ на сифилис: от показаний к назначению и правил подготовки до методов исследования и стоимости. Ложноположительные анализы на сифилис

Анализ на сифилис выявляет наличие антител на бактерий, вызывающих сифилис в тканях или крови организма.

Сифилис – заболевание передающееся половым путем, то есть при половых контактах, оральном сексе или при поцелуях.

Какие анализы сдают на сифилис?

Анализы для выявления болезни включают в себя:

• специальную пробу на наличие в организме антител, производимых человеком;
• быстрые анализы на реагины плазмы;
• иммуноферментный анализ (самый новый анализ крови на сифилис).

Все результаты анализов на сифилис показывают наличие антител к бактериям, вызывающим заболевание.

Анализы проводятся с целью:

• обнаружения заболевания сифилисом;
• контроля над лечением болезни.

Всем беременным женщинам предлагается, на ранних сроках беременности, пройти профилактический осмотр и сдать анализ на сифилис.

При условии запущенности болезни возможно:

• тяжелые заболевания сердца;
• повреждения позвоночника;
• слепоты;
• нарушения мозговой деятельности;
• смерти.

Сдача анализов на сифилис требуется серьезной подготовки.

Необходимо сообщить своему лечащему врачу:

• принимаете ли Вы антибиотики или другие медикаменты;
• есть ли у Вас аллергия на медпрепараты (антибиотики и анестетики);
• есть ли у Вас проблемы с самопроизвольным кровотечением;
• о своем состоянии беременности.

В случае обнаружения сифилиса требуется избегать половой близости, пока Вы не пройдете полного курса лечения. Ваш сексуальный партнер тоже должен пройти полное обследование.

Общий анализ крови при сифилисе выполняется, как правило, в пределах одной недели, однако, современное оборудование позволило сократить эти сроки до одних суток.

Расшифровка общего анализа крови на сифилис показывает:

Наиболее часто в венерологии используется термин «серологический анализ крови».

Этот метод обычно применяется:

• при изучении антигенов или антител в сыворотке крови;
• для установления группы крови;
• для определения наличия антител к определенным видам вирусов и бактерий (сифилису, токсоплазмозу, гепатиту, хламидиозу, кори, краснухе, паротиту, цитомегаловирусу, простому герпесу, микоплазмозу).

Современная диагностика разделяет серологический анализ на две группы:

• нетрепонемные (неспецифические) анализы;
• трепонемные (специфические) анализы.

Обычно, через четыре недели, прошедшие со времени заражения, выявляется положительный анализ на сифилис.

Если анализ показывает положительный результат, то, очевидно, человек болен этим венерическим заболеванием.

Ложноположительный анализ на сифилис встречается примерно у пяти процентов пациентов.

Возможные причины ложноположительного анализа:

• системные поражения соединительной ткани (склеродермия, дерматомиозит, ревматоидный артрит, васкулит, красная волчанка);
• инфекционные поражения (гепатиты, туберкулез, мононуклеоз, кишечные инфекции);
• воспаления сердца (миокардит, эндокардит);
• беременность;
• сахарный диабет;
• недавняя вакцинация;
• употребление наркотиков, алкоголя.

Причины возможных ложнотрицательных результатов:

• большое количество антител в крови;
• анализ взят до возможного появления антител;
• анализ взят при застарелом сифилисе (количество антител в крови значительно уменьшено).

Ложный (ошибочный) анализ на сифилис может встречаться примерно у 10% пациентов, но при повторных пересдачах анализа, эта ошибка будет обязательно замечена и выправлена.

Заметим, что анализ на сифилис при беременности сдает каждая беременная женщина.

Причем, делает она это три раза:

• при взятии на учет;
• во втором триместре;
• в третьем триместре.

При таком порядке сдачи анализов болезнь может быть выявлена своевременно.

Минимальная цена сдачи анализов на сифилис начинается от 1. 500 рублей.

hvatit-bolet.ru

Анализы крови на сифилис

Чем раньше и точнее выявлен сифилис - тем проще лечение и выше вероятность, что для пациента оно пройдет гладко.

Цель для всех лабораторных исследований одна: поставить диагноз однозначно и быстро. Но ни один из современных высокотехнологичных анализов на сифилис не дает результат однозначно и с точностью 100%. Старые методы совершенствуются, новые изобретаются, но до сих пор в клинической практике врачам всегда приходится использовать комбинацию из нескольких разных анализов на сифилис. Полагаться на результат какого-то одного медики не могут.

Анализов на сифилис существует столько разновидностей, что с ходу разобраться во всех аббревиатурах невозможно:

Впервые выявить болезнь с помощью лабораторной реакции удалось в 1906 году. Это заслуга немецкого ученого Августа Вассермана, в честь которого реакция и названа. С тех пор прошло много времени, метод устарел и на практике не используется, но до сих пор диагностика сифилиса прочно ассоциируется именно с анализом РВ.

Пройти исследование на сифилис может потребоваться человеку по самым разным причинам. Самая первая причина, что приходит в голову - при подозрении наличия инфекции, и на практике она не самая распространенная. В этом случае важно понимать, что у инфекции есть инкубационный период (от момента заражения до формирования твердого шанкра) и первичный серонегативный период (твердый шанкр в первые три недели) - в это время анализы будут отрицательными. Поэтому если опасения серьезные - анализы повторяют через несколько недель.

Чаще провериться на сифилис требуется людям, никакой инфекции не подозревающим. Обычно это происходит при приеме на работу (анализ входит в медицинскую книжку) и при периодических диспансеризациях (мед. осмотрах). Еще в обязательном порядке кровь на сифилис сдают:

• доноры,
• женщины в первые недели беременности - дважды, при поставке на учет в женскую консультацию и в роддоме за несколько недель до родов,
• пациенты перед операцией или любыми другими медицинскими инвазивными вмешательствами (ФГДС, бронхоскопия и т.д.).

В конце статьи мы ответили на самые частые вопросы людей, столкнувшихся с диагностикой сифилиса. Нет времени читать подробности про методы исследований - листайте вниз.

Все виды исследований на сифилис

Существует 2 основные группы методов исследования на сифилис: прямые и непрямые.

• Прямой метод - это исследование, при котором в биоматериале ищут саму инфекцию - отдельных представителей возбудителя целиком, или их куски - ДНК.
• Непрямые методы (серологические реакции) - это исследование, при котором в крови пытаются выявить антитела к возбудителю сифилиса. Логика такова: если найден иммунный ответ, характерный для какой-то инфекции - значит, есть и сама инфекция, этот иммунный ответ вызвавшая.

Прямые методы, - самые достоверные: если бактерия «поймана с поличным», то наличие болезни считается доказанным. Но бледную трепонему поймать сложно, и отрицательные результаты тестов наличие инфекции не исключают. Эти исследования имеет смысл проводить только при наличии высыпаний и только при ранней форме сифилиса - до двух лет болезни. Т.е. определить скрытый сифилис или поздние его формы этими методами нельзя, поэтому в клинической практике они используются редко и только для подтверждения других анализов.

К прямым методам относятся: Темнопольная микроскопия, Заражение лабораторных животных, ПЦР.

1. Темнопольная микроскопия (ТПМ) - исследование бледных трепонем под микроскопом. Материал берется из твердого шанкра или высыпаний. Метод дешевый и быстрый, и выявляет сифилис уже в самом начале первичного периода, когда анализы крови на сифилис еще отрицательны. Но бактерии, в высыпаниях находящиеся в небольшом количестве, могут легко не попасть в соскоб. Плюс бледные трепонемы можно легко перепутать с другими обитателями ротовой полости, анального канала и пр.
2. Заражение лабораторных животных - это очень дорогой и кропотливый метод, применяется только в исследовательской практике.
3. ПЦР - относительно новый метод, в нем ищут ДНК инфекции. Для исследования годится любая ткань или жидкость, в которой могут содержаться бледные трепонемы: кровь, моча, секрет простаты, эякулят, соскоб с высыпаний на коже, из мочеполового тракта, ротоглотки или конъюнктивы. Анализ очень чувствительный и специфичный. Но сложный и дорогой. Назначают его в случае сомнительных результатов других анализов.

Непрямые методы, они же серологические реакции, - основа лабораторного исследования сифилиса. Именно эти методы используют для массового скрининга населения, для утверждения диагноза и контроля лечения. Непрямые методы исследования разделяются на нетрепонемные и трепонемные тесты.

Нетрепонемные тесты заметно дешевле. Для их проведения используют не сам белок-антиген, специфичный для сифилитической трепонемы, а его замену - кардиолипиновый антиген. Эти тесты являются высочувствительными, но слабоспецифичными. Это означает, что такие тесты укажут всех, у кого имеется и сифилис и даже больше: у здоровых людей также могут быть ложноположительные результаты. Используются для массового скриннинга населения, но в случае положительного результата обязательно требуют подтверждения более специфичными тестами - трепонемными. Еще нетрепонемные тесты очень полезны в оценке эффективности лечения: при эффективном лечении объем антител в крови снижается, и соответственно снижается их титр (об этих титрах чуть дальше расскажем подробнее). Наиболее достоверным результат этих нетрепонемных тестов будет во время раннего сифилиса, особенно во вторичный период.

К нетрепонемным тестам относятся:

• Реакция Вассермана (RW, она же РВ, или РСК) - уже устарела и не используется, но из-за прочной ассоциации с болезнью так часто называют любые тесты для скрининга населения на сифилис. Если видите в направлении от врача запись «анализ РВ» - не смущайтесь, в лаборатории наверняка все поймут правильно и будут делать RPR.
• Реакция микропреципитации (МР, она же РМП) - это простой и дешевый тест на определение сифилиса. Ранее использовался в качестве основного нетрепонемного теста, но сейчас уступил место более удобному и объективному RPR-тесту.
• Быстрый плазмареагиновый тест (RPR-тест) - быстрый простой и удобный тест для массового обследования населения и контроля лечения. Является основным нетрепонемным тестом, применяющимся в России и за рубежом.
• TRUST - это более современная модификация RPR-теста. По-другому его обозначают, как RPR-тест с толудиновым красным. В России используется лишь в небольшом количестве лабораторий.
• VDRL - этот анализ по достоверности результатов аналогичен РМП, и также уступает RPR. В России он не нашел широкого применения.
• USR-тест (или его модификация - RST-тест) - более усовершенствованный VDRL тест, однако в России также применяется крайне редко.

Трепонемные тесты проводятся с трепонемными антигенами. Они более специфичны, и потому тщательнее отсеивают здоровых от больных. Но чувствительность их ниже, и такие анализы могут пропустить больного человека, особенно на ранней стадии болезни. Еще одна особенность - трепонемные тесты проявляются позже нетрепонемных, только спустя три-четыре недели после появления твердого шанкра. Поэтому их нельзя использовать в качестве скрининговых. Главное предназначение трепонемных анализов - подтвердить или опровергнуть результаты нетрепонемных тестов.

Еще результаты трепонемных анализов будут оставаться положительными в течение нескольких лет после успешного лечения. Из-за этого их не используют для контроля эффективности лечения, и также не опираются на результаты этих анализов, если они не подтверждены нетрепонемными тестами.

К трепонемным тестам относят:

• РПГА (или ее более современная модификация -ТРРА,ТРНА) - реакция пассивной гемагглютинации. Основная трепонемная реакция, применяемая сейчас за рубежом и в России. Простой и удобный тест для определения антител сифилиса в организме.
• ИФА (анти-Tr. pallidum IgG/IgM) - иммуноферментный анализ, он же ELISA с английской аббревиатуры. Этот тест возможно проводить и с кардиолипиновым антигеном, так и с трепонемным. Он может использоваться как скрининговый, так и как подтверждающий. По достоверности он не уступает РПГА и так же является рекомендуемым трепонемным тестом для подтверждения диагноза сифилиса.
• Иммуноблоттинг - это более дорогой усовершенствованный ИФА-тест. Используется только в сомнительных случаях.
• РИФ - реакция иммунофлуоресценции. Технически трудный и недешевый анализ. Является второстепенным, применяется для утверждения диагноза в сомнительных случаях.
• РИБТ (РИТ) - реакция обездвиживания (иммобилизации) бледных трепонем. Это реакция сложна, длительна в исполнении и трудна в интерпретации результата. Кое-где еще используется, но постепенно отходит на второй план, уступая место РПГА и ИФА.

Расшифровка серологических анализов на сифилис:

Алгоритм постановки диагноза «сифилис»

Любой диагноз состоит из трех основных столпов медицины: анамнеза (истории болезни), клинических проявлений (симптомов) и лабораторного обследования. Если врач по рассказу пациента и по внешнему осмотру его тела подозревает сифилис, он назначает комплекс анализов (или комплекс серологических реакций - КСР). В него обязательно входят 1 нетрепонемный тест (РМП или RPR) и 1 трепонемный тест (РПГА или ИФА). Если результаты этих тестов расходятся - выполняют дополнительный альтернативный трепонемный тест (ИФА или РПГА). Это самая простая схема. В случае сомнительных показателей, в зависимости от ситуации, врач назначает другие методы диагностики.

Экспресс-тест на сифилис, или как определить сифилис в домашних условиях

Тест на сифилис, который можно провести самостоятельно, существует. Его можно свободно купить в аптеке, средняя стоимость - 200–300 руб. Принцип определения болезни аналогичен нетрепонемному RPR. Производители заявляют высокую точность, но в реальности она невысока, не более 70%.

Алгоритм действий при проверке напоминает тест на беременность, только вместо мочи используется кровь. Капля крови наносится на индикатор, и в течение 10–15 минут появляется результат. 1 полоска - тест отрицательный, 2 полоски - тест положительный. Мы не рекомендуем этот способ диагностики. Если есть сомнения по поводу сифилиса, лучше сразу обратиться к врачу, или хотя бы в независимую лабораторию. Выйдет чуть дороже и дольше, зато намного точнее.

Расшифровка результатов на сифилис: плюсы, кресты и титры.

От результатов тех или иных анализов зависит дальнейшая тактика врача. Результаты скрининговых анализов выражаются либо в крестах (плюсах), либо в отдельной записи:

4 или 3 креста - положительный результат, необходимо дальнейшее обследование на сифилис с помощью других методов диагностики. 2 или 1 крест - сомнительный результат, рекомендуется повторить результат через 10 дней.

0 крестов - отрицательный результат, сифилис не обнаружен.

В случае положительной и сомнительной реакции проводится дополнительное исследование взятой крови: разведение ее с 1:2 до 1:1024 и добавление в каждый титр крови по капле кардиолипинового антигена. В результат записывается максимальный титр, при котором произошла реакция: чем больше разведение, тем больше значение титра, тем выше количество бледных трепонем в крови. Но главная задача определения титра состоит не в том, чтобы вычислить степень зараженности крови, а в том, чтобы проконтролировать успешность лечения: лечение считается эффективным если за 4 месяца титр упадет в 4 раза. К концу лечения результаты нетрепонемных тестов должны стать отрицательными.

Наибольшая чувствительность скрининговых тестов наблюдается во вторичном периоде сифилиса (100%), чуть меньше в первичном (86%) и еще меньшей - в третичном (73%).

Важные нюансы в диагностике сифилиса:

1. При проведении тестов возможны ложноположительные результаты. Особенно часто они встречаются при скринингах. Если вы никогда не болели сифилисом, а анализы положительные - сразу паниковать не стоит, необходимо сделать еще минимум один альтернативный анализ.
2. Встречаются и ложноотрицательные результаты. Если имеется подозрение на сифилис, то лучше повторить анализ через несколько недель.
3. Вылеченный сифилис остается положительным по результатам трепонемных тестов в течение нескольких лет или жизни.

Самые частые вопросы про анализы на сифилис

Как сдать анализ на сифилис бесплатно?

Для этого необходимо обратиться в поликлинику по месту жительства и посетить своего участкового врача, который даст направление на анализ. Исследование на сифилис является бесплатным для всех жителей РФ по полису ОМС.

Где можно сдать анализы на сифилис анонимно?

Анонимно анализы можно сдать в любой платной лаборатории, кожвендиспансеры часто сами предлагают эту услугу. Также, провести тест на сифилис возможно и в домашних условиях с помощью экспресс-тестов, которые продаются в аптеке. Однако необходимо помнить, что такой тест не дает точного результата, и при подозрении на сифилис нужно обратиться к врачу.

Через сколько дней после половой связи можно сдать кровь на сифилис?

Через 1–1,5 месяца. Если произошло заражение, то анализ на сифилис будет положительным не ранее чем через семь–десять дней после появления твердого шанкра, или через 4–5 недель после заражения. Этот период может быть и дольше, так что при отрицательных результатах анализ стоит повторить спустя 2 недели.

Откуда берут кровь на сифилис?

Кровь на сифилис берут чаще из вены, однако могут брать и из пальца. Это зависит от вида анализа.

Подготовка. Как сдавать анализ на сифилис?

Перед сдачей крови на сифилис нельзя есть в течение четырех часов - кровь должна сдаваться на голодный желудок. Кроме того, за 12 часов до анализа нельзя употреблять алкоголь. Это важно, так как повреждение печени алкоголем может спровоцировать ложноположительные анализы.

Сколько в среднем делается анализ на сифилис?

Результаты, как правило, становятся известны на следующий день. Проведение экспресс-тестов занимает по времени не более 30 минут.

Какой анализ берут на сифилис и как он называется?

Для скрининга, когда подозрения на болезнь нет, - либо РМП (реакция микропреципитации), либо RPR (быстрый плазмареагиновый тест). Иногда такие скрининговые тесты называют реакцией Вассермана.

Если есть какие-то реальные подозрения или сомнения - никогда не ограничиваются одним анализом. Одновременно выполняют один любой из скрининговой группы (РМП или RPR) и один любой из более специфичной проверочной группы (РПГА или ИФА), дальше действуют в зависимости от результатов и истории пациента.

Может ли анализ на сифилис быть ошибочным?

Может! Вероятность ошибки разных методов зависит прежде всего от периода болезни и общего состояния организма.

Нетрепонемные тесты чувствительнее всего в разгар болезни - во вторичном периоде. Из-за невысокой специфичности они часто дают ложноположительные результаты. Это может случиться из-за повышения температуры, гриппа или другой инфекционной болезни, недавно проведенной вакцинации, хронических болезней и ряда других причин.

Трепонемные тесты более чувствительны в поздний период. Они могут также давать ложноположительные результаты, но только при наличии в организме похожих на бледную трепонему патогенных бактерий, вызывающих другие заболевания: невенерические трепонематозы пинта (в России редко) или болезнь Лайма (передается через укус клещей).

Ложноотрицательные результаты тестов возможны у всех методов диагностики. Они зависят от иммунного ответа организма: нет ответа - нет реакции на сифилис. Такое возможно у ВИЧ-инфицированных людей, а также иммуно-ослабленных по другим причинам. Кроме того, существует и обратная реакция: гиперпродукция антител, эффект «прозоны», в котором антител так много, что они не дают друг другу осуществить реакцию с антигеном. В результате образуется ложноотрицательный результат.

Могут ли общие анализы показать сифилис?

Сифилис невозможно определить ни по общему анализу крови, ни по биохимическому. Не покажет его и общий анализ мочи или обычный мазок из влагалища. Все исследования на сифилис узкоспециализированы и каждый имеет свое название. По любым другим анализам невозможно вычислить, есть у человека сифилис или нет. Но что покажут другие анализы, если человек болен сифилисом? Разберем каждый из них:

Общий анализ крови: показывает основные клетки крови - эритроциты, лейкоциты, тромбоциты. В конце первичного и в начале вторичного периода у человека могут подниматься лейкоциты, а также увеличиваться СОЭ - показатель воспаления. Это очень неспецифичные показатели, указывающие просто на то, что в организме идет борьба с бактериальной инфекцией. В остальном анализ крови будет соответствовать общему состоянию организма.

Биохимический анализ крови: показывает работу печени, почек, сердца, поджелудочной железы и других органов. Если сифилис еще не поразил эти органы, и они работают исправно - анализ крови будет в норме.

Общий анализ мочи: показывает работу почек и эндокринной системы, а также общее состояние организма. Если острых или хронических заболеваний этих систем нет - анализ будет в норме.

Мазок из влагалища: определяет, есть ли воспалительный или онкологический процесс, а также дисбактериоз. Поставить сифилис по такому мазку нельзя.

Назад к разделу «Сифилис» назад к разделу «Сифилис»

polovye-infekcii.ru

Какие бывают анализы на сифилис, их расшифровка

Анализ на сифилис делают, применяя множество методик обнаружения возбудителя. При развитии патологии проявляется большое количество специфических признаков. С целью установления точного диагноза, больного обследуют комплексно. Общий анализ крови малоинформативен, его не используют при диагностировании венерической инфекции.

Виды исследований и биоматериалов для анализа

Для выявления болезни используют различные методики и биоматериалы. На ранних этапах сифилис определяют с помощью бактериоскопического теста. Образцы исследуют под микроскопом. Прибор позволяет обнаружить штаммы возбудителя. Позднее проводят серологические анализы. Благодаря им, в пробах выявляют антигены и антитела к болезни.

Способы определения половой инфекции поделены на 2 категории:

• Прямые, выявляющие патогенный микроорганизм. К ним относят: темнопольная микроскопия, RIT-анализ (инфицирование кроликов биоматериалом для исследования), метод ПЦР – полимеразной цепной реакции (с его помощью находят генетические элементы возбудителя).
• Непрямые (серологические) позволяют обнаружить антитела к патогену. Они продуцируются иммунной системой, как ответная реакция на заражение.

Серологические методики поделены на 2 категории: трепонемные и нетрепонемные.

Нетрепонемные, включающие: тест с толуидиновым красным, анализ РСК, RPR- тест, исследование крови экспресс-методом РМП.

Трепонемные, объединяющие: иммуноблоттинг, РСК-тест, РИТ-анализ, исследование РИФ, РПГА-тест, ИФА-анализ.

Информативность тестов на инфекцию различна. Чаще делают основные виды анализов на сифилис, к которым отнесены серологические методики. Пациентам, нуждающимся в обследовании, врач назначает тесты индивидуально.

Биоматериал для исследования

Чтобы выявить бледную трепонему – патогена, который выглядит, как спираль и вызывает сифилис, берут пробы:

• венозной крови;
• ликвора (секрета из спинномозгового канала);
• содержимое лимфатических узлов;
• ткани изъязвлений.

Если необходимо провести тесты на обнаружение сифилиса, кровь сдают не только из локтевой вены, но и из пальца. На выбор биоматериала и способ исследования влияет тяжесть течения инфекции и оснащенность диагностического центра.

Прямые исследования

Убедительным доказательством сифилиса является выявление возбудителей инфекции под микроскопом. Таким способом находят патоген у 8 обследуемых из 10. Отрицательный результат у 2 оставшихся пациентов не говорит о том, что они не инфицированы.

Исследование делают на первичном и вторичном этапе (стадии) заболевания, для которых характерно появление высыпаний на коже и сифилом (изъязвлений) на эпителиальных тканях или слизистых оболочках. В отделяемом из очагов поражения находят патогены, вызывающие венерическое заболевание.

Точнее с определением трепонем справляется сложный тест, обозначающийся как РИФ – реакция иммунофлуоресценции. Образец для исследования предварительно обрабатывают флуоресцентными антителами. Соединения, способные светиться, склеиваются с бактериями. Рассматривая под микроскопом образцы, в случае заражения лаборант видит сверкающих возбудителей.

Тест используют для раннего диагностирования болезни. Чем дольше длится заболевание, тем ниже чувствительность исследовательских способов. Кроме того, она падает после обрабатывания высыпаний и язв антисептическими средствами и у пациентов, прошедших лечение. Изредка исследование дает ложноотрицательные и ложноположительные результаты.

RIT-анализ – высокоточный способ обнаружения сифилиса. При проведении теста результаты приходится ждать долго. До тех пор, пока у инфицированного кролика не проявятся признаки инфекции. Тест применяют очень редко, несмотря на то, что он сверхточен.

С помощью полимеразной цепной реакции на сифилис определяют генетические элементы патогенов. Единственный недостаток ПЦР – дороговизна.

Нетрепонемные тесты

Такие анализы крови помогают выявить антитела, появляющиеся в ответ на кардиолипин – соединение, относящееся к общему строению мембран патогенов.

Реакция Вассермана (РВ или RW)

Самым известным исследованием на сифилис считается реакция Вассермана. РВ входит в категорию реакций связывания комплемента (РСК). Новые методы РСК обладают существенными отличиями от традиционной RW. Но обозначаются они, как и раньше понятием «реакция Вассермана».

Иммунная система, синтезирует антитела (маркеры) в ответ на вторжение трепонем. Их выявляют при анализе крови на сифилис методом реакции Вассермана. Положительный результат RW подтверждает инфицирование обследуемого.

Реакция гемолиза – индекс РВ анализа. При ней взаимодействуют 2 субстанции: гемолитическая сыворотка и эритроциты барана. Сыворотку делают, иммунизируя кролика эритроцитами барана. Активность биологической жидкости снижают путем прогревания.

Показатели РВ зависят от того, прошел гемолиз или нет. В пробе чистой от маркеров происходит гемолиз. При этом реакция на антигены невозможна. Комплемент тратится на взаимодействие с бараньими эритроцитами. Когда в образце есть маркеры, комплимент вступает в реакцию с антигенами. В этом случает гемолиз не протекает.

Компоненты для RW отмеряют в равном количестве. Образец, содержащий сыворотку, антиген и комплимент, прогревают. Добавляют в пробу бараньи эритроциты и сыворотку. Держат при температуре 37 градусов, пока не наступит гемолиз в контрольном образце, который вместо антигена содержит физраствор.

Для проведения РВ используют готовые антигены. На упаковках указывают титры и технологию их разбавления. Позитивный результат RW обозначается крестиками. Готовые результаты тестов обозначаются следующим образом:

• ++++ – максимально позитивные (гемолиз задержался);
• +++ – положительные (гемолиз существенно запаздывает);
• ++ – слабо позитивные (гемолиз частично промедлил);
• + – сомнительные (гемолиз припозднился незначительно).

При отрицательной РВ гемолиз полностью осуществился во всех образцах. Но в некоторых случаях получают ложноположительные данные. Такое происходит, когда кардиолипин входит в состав клеток. Защитные механизмы не продуцируют маркеры к «родному» кардиолипину.

Однако изредка возникают исключительные ситуации. Положительную RW выявляют у незараженных людей. Такое возможно, если пациент перенес тяжелую болезнь, вызванную вирусами (пневмонию, малярию, туберкулез, патологии печени и крови). Положительной РВ бывает у беременных. Обусловлено это тем, что иммунитет чрезмерно ослаблен.

Если возникает подозрение, что результат анализа на сифилис ложноположительный, пациента обследуют дополнительно. Проблема в том, что эту инфекцию невозможно выявить по единственному клинико-лабораторному тесту. Часть исследований дает ложные показатели, которые бывают, как отрицательными, так и положительными.

Получить достоверные данные помогает развернутый анализ на сифилис. Благодаря ему устанавливают истинный диагноз: доказывают заражение или исключают его. Кроме этого, расширенный тест позволяет остановить развитие инфекции, исключить проведение ненужной терапии.

РСК и РМП

Проводя обследование на сифилис, традиционную реакцию Вассермана применяют крайне редко. Вместо нее используют метод РСК. Анализ дает положительный результат спустя 2 месяца после инфицирования. При вторичной форме заболевания он положителен почти в 100% случаев.

Способ микропреципитации (РМП) – исследование с механизмом аналогичным реакции Вассермана. Методика проста в исполнении. Она быстро проводится. Для исследования кровь на сифилис в этом случае сдают из пальца. Методика дает положительный результат через 30 дней с момента появления сифилом. Ошибки при исследовании не исключены. Ложноположительные данные получают на фоне: обострившихся инфекций, пневмонии, инфаркта, инсульта, интоксикации.

К ошибочным тестам приводит:

• туберкулез;
• болезнь Бенье́-Бека-Ша́умана;
• ревматоидные заболевания;
• диабет;
• цирроз;
• бруцеллез;
• лептоспироз;
• мононуклеоз.

Обнаружив сомнительный анализ на сифилис, делают трепонемные исследования. Они помогают уточнить диагноз.

RPR и тест с толуидиновым красным

Метод плазменных реагинов (RPR) – очередной аналог реакции Вассермана. Его применяют, когда необходимо:

• провести скрининг бессимптомных лиц;
• подтвердить сифилис;
• исследовать донорскую кровь.

Тест с толуидиновым красным, как и RPR, проводят, чтобы оценить динамику лекарственной терапии. Их показатели падают при отступлении болезни, и увеличиваются, когда патология рецидивирует.

Нетрепонемные анализы показывают насколько больной излечился. Получение отрицательных результатов на сифилис говорит о том, что болезнь отступила полностью. Первое обследование делают спустя 3 месяца после курсовой терапии.

Трепонемные исследования

Высоко результативные анализы проводят, используя трепонемные антигены. Их делают, когда:

• получен положительный результат при методе РМП;
• необходимо распознать ошибочные данные, возникающие при скрининговых тестах;
• подозревают развитие сифилиса;
• нужно диагностировать скрытно текущую инфекцию;
• надо провести ретроспективную диагностику.

Тесты РИФ и РИТ

У множества пролеченных больных трепонемные исследования проб дают положительные результаты долгое время. По ним нельзя судить о степени эффективности лечения. РИТ и РИФ – сверхчувствительные тесты. Благодаря им получают достоверные данные. Эти анализы трудоемки, они требуют приличных временных затрат, наличия прогрессивного оборудования. Их способны проводить квалифицированные медработники.

Выполняя РИФ анализ на сифилис, положительные данные получают спустя 2 месяца после инфицирования. Отрицательные параметры подтверждают, что обследуемый здоров. Положительные – позволяют предположить, что человек инфицирован.

РИТ проводят, когда реакция микропреципитации положительна. Такой анализ крови на сифилис помогает опровергнуть или удостоверить наличие инфекции. Тест сверхчувствителен, он точно указывает заражен пациент или здоров. Но исследование дает достоверные данные только через 3 месяца после проникновения трепонем в организм.

Метод иммуноблоттинга

К сверхточным тестам относят иммуноблоттинг. Такой анализ крови при сифилисе делают редко. Его применяют при обследовании новорожденных детей. Он не пригоден для экспресс-тестирования. Положительные результаты получают с опозданием. Их гораздо раньше дает метод микропреципитации.

ИФА и РПГА

К информативным сверхточным методам исследования относят тесты ИФА и РПГА. С их помощью проводят экспресс-диагностирование. Лаборанты делают огромное количество таких анализов. Благодаря им удается установить точный диагноз.

РПГА анализ на сифилис положителен через 30 дней после проникновения возбудителя в организм. С его помощью диагностируют первичную инфекцию, когда появляются язвы и сыпь.

Благодаря ему удается выявить запущенные, скрытно текущие, а также врожденные формы патологии. Но проводят его совместно с нетрепонемными и трепонемными тестами. Комплексное диагностирование гарантирует достоверность результатов. Тройное тестирование точно доказывает наличие или отсутствие венерической инфекции.

Положительная реакция сохраняется на протяжении большого отрезка времени. По этой причине исследование не используют для оценки эффективности лечения.

ИФА анализ положителен спустя 21 день с момента заражения. Тест иногда дает ошибочные результаты. Они появляются при системных патологиях, нарушенных обменных процессах. Их результативность сомнительна у ребенка, родившегося от инфицированной матери.

Погрешности, получаемые при серологических способах исследования, стали причиной открытия прогрессивных методик диагностики. Газовая хроматография и масс-спектрометрия не дают ложных результатов. Единственное препятствие для их массового использования – дороговизна.

Алгоритм диагностирования

• При нахождении сифилиса в первичной фазе (до 60 дней с момента инфицирования), возбудителя отыскивают на темном фоне или используют для их обнаружения флюоресцирующие антитела.
• Если патология находится в первичной, вторичной или скрытой форме применяют РМП и ИФА. Подтвердить результаты помогает РПГА анализ крови на сифилис.
• При рецидивах вторичной инфекции анализируют отделяемое изъязвлений и высыпаний. Из образцов извлекают возбудителей, изучают их с помощью микроскопии.
• Когда заболевание входит в третичную фазу, у 1/3 пациентов РМП отрицательная. При этом результаты ИФА и РПГА положительны. Однако они не всегда указывают на третичный период, а подтверждают, что человек раньше перенес инфекцию. Слабоположительный тест – доказательство полного излечения, а не развития третичной фазы.
• Подтверждая врожденный сифилис, анализ крови берут у матери и младенца. Сравнивают данные тестов РМП. Учитывают то, что у малыша ИФА и РПГА положительны. Подтверждают диагноз, используя методику иммуноблоттинга.

Сифилис, как любая системная патология, поражает весь организм. Поэтому обследование на него проходят при беременности, перед абортом. Пациенткам делают РМП, ИФА, РПГА.

Как сдать анализ

Отправляет пациентов на анализ врач-венеролог. Частные лаборатории делают анонимные исследования на сифилис по желанию клиента. Для сдачи теста в них не нужно направление врача.

Правила проведения исследования:

• Кровь в лаборатории берут утром на пустой желудок (едят после процедуры). До анализа разрешено пить только воду.
• За 2 суток до обследования запрещено: питаться жирной едой и употреблять спиртное.
• Кровь берут из пальца или вены.
• Сколько длится исследование? Обычно не больше суток. Расшифровку анализов на сифилис получают у лаборантов либо лечащего врача.
• Сколько действителен тест? По прошествии 3 месяцев результаты анализов теряют силу. Их сдают снова.

Если расшифровка анализа показывает, что тест положителен, необходимо посетить венеролога, который назначит дополнительное обследование для точного подтверждения диагноза и подберет схему необходимого лечения.

Тестирование спинномозгового содержимого

Диагноз нейросифилис ставят после того, как исследуют ликвор. Такой анализ делают:

• людям со скрытой формой инфекции;
• при симптомах заболеваний нервной системы;
• бессимптомном, запущенном нейросифилисе;
• выздоровевшим больным с положительными серологическими реакциями.

Направление на исследование ликвора дает врач. Из спинномозгового канала берут пункцию в 2 пробирки. Прокол смазывают йодом, закрывают стерильной салфеткой. После процедуры пациент соблюдает постельный режим на протяжении 2 дней.

В 1 образце определяют количество белка, клеток, следы менингита. Во второй пробе вычисляют антитела к возбудителю сифилиса. Для этого делают тесты: РВ, РМП, РИФ и РИБТ.

В зависимости от того сколько выявлено нарушений, различают 4 разновидности ликвора. Каждая указывает на определенные повреждения нервной системы. Врач диагностирует:

• сосудистый нейросифилис;
• сифилитический менингит;
• спинную сухотку и прочее.

Помимо того, по результатам тестов судят о выздоровлении пациента.

Интерпретация тестов – задача врача. Только он способен сделать правильные выводы, при необходимости назначить дополнительное обследование, поставить точный диагноз. Не стоит делать самостоятельную диагностику при опасной системной патологии. Ошибка в диагнозе влечет за собой серьезные последствия.

Нашли ошибку в тексте? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, и мы все исправим!

Лабораторные тесты позволили значительно расширить возможности современной медицины. Особенно ценными они считаются в диагностике инфекционных заболеваний, в частности сифилиса. Как называется анализ на сифилис, какой подготовки требует, по каким правилам проводится? Об особенностях лабораторной диагностики этой распространенной венерической патологии поговорим в нашем обзоре.

Особенности сифилиса

Несмотря на то, что в эпоху Средневековья сифилис (прежнее название инфекции – люэс, от латинского «зараза») наводил на города и села ужас, становясь причиной смерти десятков тысяч людей, сегодня эта болезнь считается хоть и неприятной, но вполне даже излечимой. Так ли это на самом деле?

Сифилис – специфическое венерическое заболевание, вызываемое патогенными спирохетами бледными трепонемами. Заражение ими происходит при тесном контакте с больным, лидирующие позиции по распространению инфекции занимают незащищённые половые контакты.

Ещё несколько десятилетий назад распространенными оставались вертикальный и гемотрансфузионный пути передачи. Первый связан с инфицированием плода, находящегося в утробе, от больной матери. Второй – с переливанием реципиенту инфицированной донорской крови. В настоящее время такие пути заражения – редкость, поскольку и беременным женщинам и лицам, решившим стать донорами, нужно неоднократно сдавать скрининговые анализы на сифилис.

С момента заражения до появления первых признаков инфекции может пройти от 10 дней до полугода (в среднем 1 месяц).

• Клиническое проявление первичной формы заболевания – сифилома (шанкр) — небольшое безболезненное уплотнение или язвочка в месте проникновения трепонем в организм. Чаще оно развивается на коже наружных половых органов.
• Через несколько недель сифилома полностью рассасывается, а человек чувствует себя абсолютно здоровым. Однако спустя 1-2 месяца появляется основной симптом вторичного сифилиса – полиморфная сыпь на коже в виде неярких розовых пятен. Кожные проявления – признак распространения возбудителя по всему организму. Продолжительность этой стадии – несколько лет.
• Если не было проведено лечение вторичного сифилиса, развивается конечная, третичная форма инфекции. Трепонема активно поражает все органы и ткани, на них появляются гуммы – плотные узлы, которые со временем разрушаются и оставляют грубые соединительнотканные рубцы.

Таким образом, диагностированные на начальной стадии первичная и даже вторичная формы сифилиса успешно лечатся приемом антибиотиков. Поздние варианты патологии приводят к необратимым деструктивным изменениям в организме, опасным осложнениям со стороны нервной и репродуктивной системы. Они тяжело подвергаются коррекции и могут стать причиной инвалидизации больного.

Успешность терапии этого хронического инфекционного заболевания во многом зависит от своевременной диагностики. Какие анализы сдают на сифилис, и что они могут показать: давайте разбираться.

Показания к проведению анализов

Лабораторные анализы на сифилис сегодня можно сдать в любой частной или государственной лаборатории. Среди показаний к проведению теста:

• скрининговое обследование всех беременных женщин (анализ обязательно сдается дважды: при постановке на учёт и на сроке 30-32 недели);
• обследование лиц, желающих стать донорами крови;
• диспансерное обследование некоторых категорий работающих лиц (например, госслужащих, военных, медиков, работников общепита);
• комплексная диагностика пациентов перед проведением плановой операции или госпитализацией на стационарное лечение;
• указание в анамнезе на незащищённый половой контакт;
• наличие клинических проявлений сифилиса.

Обратите внимание! Сегодня проверить состояние своего здоровья в домашних условиях может любой желающий. Для этого достаточно приобрести экспресс-тест на определение сифилиса в аптеке.

Подготовка к обследованию

В зависимости от типа обследования пациенту нужно сдавать венозную или капиллярную кровь.

Читайте также по теме

Что такое врожденный сифилис, какие его признаки и способы лечения?

Для проведения экспресс-тест достаточно одной капли биологической жидкости из пальца. Особая подготовка для таких анализов не требуется, единственная рекомендация – не курить 30-40 минут перед забором крови и не употреблять алкоголь в течение суток.

Требования при выполнении анализа с использованием венозной крови несколько шире. Помимо ограничения вредных привычек пациентам рекомендуется:

• отказаться от интенсивных физических нагрузок за 2-3 дня до исследования;
• накануне теста употреблять легкоусвояемую пищу;
• соблюдать правила полноценного сна;
• в день обследования можно пить только негазированную воду: кровь из вены сдается строго натощак.

Какие анализы сдаются для выявления инфекции?

Основу лабораторной диагностики венерической патологии составляют тесты, направленные на выявление специфических антител, синтезируемых костным мозгом в ответ на повреждающее действие бледных трепонем.

Поскольку основным биологическим субстратом для диагностики сифилиса является сыворотка крови (реже – плазма), все анализы объединяются под общим названием серологических тестов, которые делятся на трепонемные и нетрепонемные.

Особенности нетрепонемных тестов

Нетрепонемные анализы – используются для скринингового обследования и оценки эффективности проводимого венерологом лечения.

Нетрепонемные анализы основаны на взаимодействии не с возбудителем сифилитической инфекции, а с липидными комплексами, возникающими при разрушении его клеток. Во время химической реакции специфического реагента с находящимися в организме антителами формируются комплексы АГ-АТ (антиген-антитело), которые выпадают в осадок и доступны для оценки невооружённым глазом. Реакция считается:

• отрицательной (-), если хлопьев и любых видов осадка нет;
• слабоположительной/сомнительной (+, ++), если обнаружены хлопья небольшого размера;
• положительной (+++, ++++), если можно увидеть крупные хлопья в осадке.

Важно знать, что нетрепонемные тесты сохраняют ложноотрицательные значения на протяжении 1-1,5 месяцев после инфицирования. Первичная сифилома – первый признак классического течения сифилиса – обычно опережает положительные значения теста на 7-28 дней.

Несмотря на высокую скорость получения результатов обследования и дешевизну многих нетрепонемных тестов, результативность их остаётся невысока. Данные тесты способны диагностировать первичный сифилис в 75-90%, вторичный – в 100%, а третичный – не более чем в 30-50% случаев. Для подтверждения диагноза «сифилис» необходимо проведение специфических тестов, называемых в медицине трепонемными.

Реакция Вассермана

Реакция Вассермана (RW) – известный и проверенный временем тест для определения возбудителя сифилиса в крови. Он основан на получении сыворотки крови с инактивированным собственным комплементом. Затем подготовленный биоматериал делят на две части: одну из них обрабатывают сифилитическим антигеном, другую – кардиолипиновым.

Оценка результатов происходит по скорости гемолиза (разрыва мембраны и полного разрушения) эритроцитов:

• полный (-) – отрицательный результат;
• непродолжительная задержка (+) – сомнительный результат;
• частичная задержка (++) – слабоположительный результат;
• продолжительная/абсолютная задержка гемолиза (+++, ++++) – положительный результат.

Положительной RW становится через 2-3 недели после появления первичной сифиломы. Результативность теста при вторичной форме заболевания – 100%, при третичной –75%.

Особенности трепонемных тестов

Трепонемные анализы применяются для углубленной диагностики венерической инфекции, среди них выделяют:

• РИФ (анализ, основанный на применении метода флюоресценции);
• РИТ (реакция оценки обездвиживания живых Tr. pallidum);
• ИФА (иммуноферментный анализ);
• РСК (реакция, при которой происходит связывание иммунной системы комплемента);
• РПГА (реакция пассивного «склеивания» форменных элементов);
• метод иммуноблота.

Читайте также по теме

Когда возможен ложноположительный анализ на сифилис?

Специфические и высокочувствительные методы серодиагностики получили название трепонемных. Они позволяют выявить антитела (иммуноглобулины) непосредственно к антигенным структурам возбудителясифилиса — бледным трепонемам.

РПГА

РПГА тест готовят на основе эритроцитов животных, сенсибилизированных антигеном бледной трепонемы. Его добавляют к сыворотке пациента и спустя 1 час оценивают результаты:

• точка в центре (-) – отрицательная реакция;
• незавершенное кольцо (+) – сомнительная;
• кольцо из клеток, подвергшихся агглютинации (++, +++, ++++) – положительный результат.

Иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ – высокочувствительный и специфичный метод серодиагностики сифилиса. Основан на взаимодействии антител человека, меченных энзимов, и лабораторного реагента. Позволяет с высокой точностью определить наличие IgM (маркер острого воспаления), IgG (маркер хронического воспаления) и IgA (иммуноглобулина, содержащегося в жидкостях – грудном молоке, слюне). Помимо обследования пациентов, используется для контроля терапии.

Иммунофлюоресцентные анализы позволяют с высокой чувствительностью диагностировать сифилис ещё до появления его первых симптомов. Они показывают положительные результаты уже спустя 5-7 дней после инфицирования. Флюоресцеины антител, соединяясь со специфическими антителами сыворотки, создают светящиеся комплексы:

• фоновое окрашивание (-) – отрицательный результат;
• слегка заметное свечение (+) – слабоположительный реакция;
• свечение бледно-зеленого цвета — ++;
• зелёное свечение — +++;
• яркое зелено-желтое свечение — ++++.

РИТ

РИТ (реакция иммобилизации Tr. pallidum) – метод, используемый для диагностики скрытых форм венерического заболевания. В основу этого трудоемкого теста положен феномен прекращения двигательной активности живых трепонем при взаимодействии с комплексом «АГ+АТ». В условиях лаборатории к очищенной сыворотки пациента добавляют живых возбудителей сифилиса. Оценка результатов проводится по следующей схеме:

• обездвиженные бактерии, которые исследователь наблюдает в окуляр микроскопа, составляют менее 20% — отрицательный результат;
• 21-30% (++) – сомнительный;
• 31-50% (+++)- слабоположительный;
• свыше 50% (++++) – положительный.

Обратите внимание! Для проведения РИТ важно, чтобы пациент принимал противомикробные средства не позже чем за четыре недели до забора крови.

Иммуноблот

Иммуноблот – самый инновационный и надёжный метод диагностики описываемой патологии, исключающий ложноположительные и ложноотрицательные результаты. Как и другие тесты, он основан на взаимодействии комплекса «антиген-антитело». Сыворотку исследуемого человека наносят на подготовленную мембрану, покрытую антигенами возбудителя. В случае нахождения в ней специфических IgM и IgG на тест-системе появляются полоски. В дальнейшем лаборант оценивает расположение этих полос и интенсивность их окраски.

Расшифровка результатов

В комплексной диагностике сифилиса важно проведение нескольких тестов, дополняющих друг друга. В таблице ниже представлена интерпретация результатов обследования в зависимости от показателей нетрепонемных и трепонемных анализов.

Сифилис – заболевание, способное вызвать тяжёлые для жизни и здоровья пациента осложнения. Но оно развивается очень медленно, в течение нескольких лет, и это значит, что у человека есть достаточно времени, чтобы пройти обследование и своевременно победить инфекцию в своём организме.

Высшее медицинское образование, врач венеролог, кандидат медицинских наук.

Часто молодые люди, не обладающие опытом и знаниями в медицине, не знают, что такое сифилис и из-за своей неопытности делают ошибки и теряют драгоценное время. Необходимо знать, что сифилис – это инфекция, передающаяся половым путём. Болезнь вызвана бактерией спирохеты, которая при попадании в кровь, вызывает обратную реакцию организма в виде вырабатывания антител.

Наиболее точный и достоверный анализ на сифилис РПГА – расшифровывается, как реакция пассивной гемагглютинации. Это так называемый специфичный анализ, потому что он выявляет антитела, вырабатываемые организмом при попадании бактерии спирохеты в кровь.

Ни один из анализов не даёт 100% гарантии в правильности поставленного диагноза. Поэтому на практике применяют 2 или 3 метода исследования для взаимного подтверждения или опровержения диагноза. Наилучшие результаты получаются у методов, основанных на использовании сыворотки крови за счёт присутствующих там антител. Такие анализы проходят в двух направлениях:

1. Не специфические тесты, которые являются не точными, но простыми и быстрыми и годятся для выявления сифилиса у большой группы людей.
2. Специфические тесты, имеют высокую степень достоверности и назначаются для подтверждения диагноза.

В том или другом случае оценку может давать только специалист, но и пациенты имеют право знать, как берут анализ на сифилис.

Не специфические:

• Реакция микропреципитации (РМП), при которой используют кровь из пальца. Эффективен РМП тест после месяца заражения сифилисом. Метод РМП применяется для первичного обнаружения сифилиса. При положительной РМП реакции доктор назначает дополнительные исследования. Кровь берётся натощак, т.о поужинав в 20-00 рекомендуется не есть жирное, острое, не употреблять спиртные напитки. Утром не завтракать и сдать кровь на анализ. В этот промежуток можно пить только негазированную воду. РМП метод прост, он даёт быструю реакцию на причину болезни и поэтому пригоден для массовой проверки больших групп людей. Метод эффективен после 3 недель заражения;
• Реакция Вассермана (PB, RW), используют кровь из вены. Метод во многом похож на предыдущий, но обладает меньшей чувствительностью. Эффективен на 6-8 неделе после заражения. Кровь сдаётся на голодный желудок. Если реакция положительная, то назначаются дополнительные анализы.

Специфические:

• Реакция иммунофлуоресценции (РИФ – метод Кунса), используется с применением венозной крови, диагностирует сифилис на ранней стадии. По этому методу антитела вырабатываемые в крови подсвечиваются в ультрафиолетовом свете и под микроскопом видно это свечение. Этот способ обладает большой степенью достоверности после 6-8 месяца заражения;
• Реакция пассивной агглютинации (РПГА), используется такая же венозная кровь, обладает высокой степенью чувствительности. Используется свойство, когда эритроциты здоровой и заражённой крови слипаются, что видно под микроскопом. Данный способ часто используют в качестве первичного анализа заражения, и он требует подтверждения другими методами;
• Иммуноферментный анализ (ИФА), состоит из компонентов – иммунной и ферментативной реакции, и обеспечивает высокую степень надёжности результата. Базируется на анализе количества и качества антител в крови заражённой сифилисом. Даёт большую степень достоверности результатов на 3 неделе после заражения и в дальнейшем на всей продолжительности болезни. Как тест для подтверждения факта что пациент излечился окончательно данный способ не подходит, так как положительная реакция может сохранятся всю жизнь;
• Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), обеспечивает хорошую достоверность после 12 недель инфицирования. Основана на реакции возбудителя спирохеты замирать в определённой среде. Под микроскопом видно сколько процентов бактерий замерло и это даёт основание сделать выводы о болезни. Данный метод объективно необходим для проверки излечения пациента от сифилиса. Он может подтвердить исчезновение антител, вырабатываемых иммунной системой человека при попадании бактерий спирохеты в кровь;
• Иммуноблотинг, является новейшим методом, использующим достижения современной техники, антитела выявляют с помощью радиоизотопного или ферментного способов. Идёт изучение материалов путём сравнивания радиоизотопного излучения образцов пациента с контрольными и при совпадении спектра подтверждение реакции является практически 100%. Метод требует наличия дорогого оборудования и материалов, а также высококвалифицированного персонала.

Все вышеперечисленные методы исследований, кроме последнего, могут давать и ложную положительную реакцию из-за различных препятствий, и не являются 100% достоверными. Но в сочетании 2-3 методов достоверность практически 100%. В случае если у пациентов есть дополнительные болезни и они принимают лекарства от них, то получение ложного результата очень вероятно .

Нужно помнить, что необходимо всегда внимательно следить за своим здоровьем. Избегать случайных половых связей, а также предохраняться.

Анализ на сифилис делают, применяя множество методик обнаружения возбудителя. При развитии патологии проявляется большое количество специфических признаков, поэтому с целью установления точного диагноза больного человека обследуют комплексно. Общий анализ крови при этом малоинформативен, его не используют при диагностировании данной венерической инфекции.

Виды исследований и биоматериалов для анализа

Для выявления болезни используют различные методики и биоматериалы. На ранних этапах сифилис определяют с помощью бактериоскопического теста. Образцы исследуют под микроскопом. Прибор позволяет обнаружить штаммы возбудителя. Позднее проводят серологические анализы крови. Благодаря им, в пробах выявляют антигены и антитела сифилиса.

Способы определения половой инфекции поделены на 2 категории:

• Прямые, выявляющие патогенный микроорганизм. К ним относят: темнопольная микроскопия, RIT-анализ (инфицирование кроликов биоматериалом для исследования), метод ПЦР – полимеразной цепной реакции (с его помощью находят генетические элементы возбудителя).
• Непрямые (серологические) позволяют обнаружить антитела к патогену. Они продуцируются иммунной системой, как ответная реакция на заражение.

Серологические методики поделены на 2 категории: трепонемные и нетрепонемные.

• Нетрепонемные, включающие: тест с толуидиновым красным, анализ РСК, RPR- тест, исследование крови экспресс-методом РМП.
• Трепонемные, включающие: иммуноблоттинг, РСК-тест, РИТ-анализ, исследование РИФ, РПГА-тест, ИФА-анализ.

Информативность тестов на инфекцию различна. Чаще делают основные виды анализов на сифилис, к которым отнесены серологические методики.

Биоматериал для исследования

Чтобы выявить бледную трепонему – патогена, который выглядит, как спираль и вызывает сифилис, берут пробы:

• венозной крови;
• ликвора (секрета из спинномозгового канала);
• содержимое лимфатических узлов;
• ткани изъязвлений.

Если необходимо провести тесты на обнаружение сифилиса, кровь сдают не только из локтевой вены, но и из пальца. На выбор биоматериала и способ исследования влияет тяжесть течения инфекции и оснащенность диагностического центра.

Прямые исследования

Убедительным доказательством сифилиса является выявление возбудителей инфекции под микроскопом. Таким способом находят патоген у 8 обследуемых из 10. Отрицательный результат у 2 оставшихся пациентов не говорит о том, что они не инфицированы.

Исследование делают на первичном и вторичном этапе (стадии) заболевания, для которых характерно появление высыпаний на коже и сифилом (изъязвлений) на эпителиальных тканях или слизистых оболочках. В отделяемом из очагов поражения находят патогены, вызывающие венерическое заболевание.

Точнее с определением трепонем справляется сложный тест, обозначающийся как РИФ – реакция иммунофлуоресценции. Образец для исследования предварительно обрабатывают флуоресцентными антителами. Соединения, способные светиться, склеиваются с бактериями. Рассматривая под микроскопом образцы, в случае заражения лаборант видит сверкающих возбудителей.

Тест используют для раннего диагностирования болезни. Чем дольше длится заболевание, тем ниже чувствительность исследовательских способов. Кроме того, она падает после обрабатывания высыпаний и язв антисептическими средствами и у пациентов, прошедших лечение. Изредка исследование дает ложноотрицательные и ложноположительные результаты.

RIT-анализ – высокоточный способ обнаружения сифилиса. При проведении теста результаты приходится ждать долго. До тех пор, пока у инфицированного кролика не проявятся признаки инфекции. Тест применяют очень редко, несмотря на то, что он сверхточен.

С помощью полимеразной цепной реакции на сифилис определяют генетические элементы патогенов. Единственный недостаток ПЦР – дороговизна.

Нетрепонемные тесты

Такие анализы крови помогают выявить антитела, появляющиеся в ответ на кардиолипин – соединение, относящееся к общему строению мембран патогенов.

Реакция Вассермана (РВ или RW)

Самым известным исследованием на сифилис считается реакция Вассермана. РВ входит в категорию реакций связывания комплемента (РСК). Новые методы РСК обладают существенными отличиями от традиционной RW. Но обозначаются они, как и раньше понятием «реакция Вассермана».

Иммунная система, синтезирует антитела (маркеры) в ответ на вторжение трепонем. Их выявляют при анализе крови на сифилис методом реакции Вассермана. Положительный результат RW подтверждает инфицирование обследуемого.

Реакция гемолиза – индекс РВ анализа. При ней взаимодействуют 2 субстанции: гемолитическая сыворотка и эритроциты барана. Сыворотку делают, иммунизируя кролика эритроцитами барана. Активность биологической жидкости снижают путем прогревания.

Показатели РВ зависят от того, прошел гемолиз или нет. В пробе чистой от маркеров происходит гемолиз. При этом реакция на антигены невозможна. Комплемент тратится на взаимодействие с бараньими эритроцитами. Когда в образце есть маркеры, комплимент вступает в реакцию с антигенами. В этом случает гемолиз не протекает.

Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — . При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.

Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.

Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.

Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Антитела к бледной трепонеме IgM

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после , через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела к бледной трепонеме IgG

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Неспецифические антитела

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительные анализы на сифилис

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Лабораторная диагностика сифилиса с применением серологических реакций

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

1. Нетрепонемные тесты

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

3. Тесты на сифилис с использованием рекомбинантных антигенов

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.

Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

Диагностика сифилиса с применением нетрепонемных тестов

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления . Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, . Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с , в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.

Микрореакция преципитации (МРП)

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.

Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.

Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).

Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.

Диагностика сифилиса с применением трепонемных тестов

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, РИТ)

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А. Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ)

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

Иммуноферментный анализ на сифилис (ИФА)

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА)

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.

Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).

Рис. 13. Вид перевернутого зонтика, занимающего все дно пробирки, свидетельствует о положительной реакции. В случае, когда эритроциты оседают столбиком («пуговка») в центре дна пробирки говорят об отрицательной реакции.

Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.

Микробиологическая диагностика

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

ПЦР на сифилис

Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.

Рис. 21. ПЦР на сифилис позволяет обнаружить ДНК или ее фрагменты бледных трепонем.

Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.

Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.

ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.

Рис. 22. Выявление ДНК бледной трепонемы с применением ПЦР говорит либо о наличии жизнеспособных бактерий, либо об остатках погибших, но содержащих способных к образованию дополнительных копий отдельных участков хромосомной ДНК.